Оплодотворение методом ИКСИ – в каких случаях оно применяется и как проводится

Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), то есть оплодотворение вне организма женщины, используется в случаях невозможности беременности посредством других методов.

Для достижения этой цели применяется одна из методик ЭКО — процедура ИКСИ (ICSI —Intra Cytoplasmic Sperm Injection), означающая (в переводе с английского языка) «внутрицитоплазматическое введение сперматозоида». Согласно статистике, она необходима у 70% пациентов, нуждающихся в ЭКО.

Метод ИКСИ — что это?

Процедура ИКСИ

Процесс ЭКО заключается в получении яйцеклетки, созревшей при естественном или стимулированном менструальном цикле, оплодотворении ее и переносе одного или двух наилучших эмбрионов в полость матки, в результате чего ожидается наступление беременности.

При классическом ЭКО полученные яйцеклетки смешиваются в пробирках со сперматозоидами, которые в процессе оплодотворения самостоятельно преодолевают три барьера ооцита:

  • слой клеток лучистого венца;
  • блестящую оболочку, в области которой множество погибающих мужских половых клеток выделяют фермент гиалуронидазу; она растворяет участок блестящей оболочки яйцеклетки, чем способствует проникновению одного из сперматозоидов;
  • непосредственно оболочку клетки.

Так при определенных условиях и происходит самостоятельное оплодотворение.

Микроманипуляционный метод ИКСИ при ЭКО сводится к искусственному преодолению всех трех барьеров на пути одного сперматозоида. Для проведения процедуры необходимы соответствующие реактивы, специальная дорогостоящая аппаратура с манипуляторами и обученные специалисты-эмбриологи.

Когда и как проводится процедура ИКСИ?

Инвертированный микроскоп для процедуры ИКСИ

Она осуществляется посредством электрического или гидравлического микроманипулятора высокой точности, позволяющего осуществлять ручные манипуляции под инвертированным микроскопом, и стеклянных инструментов — инъекционной иглы-микропипетки и микроприсоски-капилляра.

Принцип процедуры ИКСИ заключается, в отличие от классического ЭКО, в использовании не всех полученных сперматозоидов и нескольких яйцеклеток, а в отборе по морфологическим признакам созревшей и подготовленной яйцеклетки и единственного интенсивно активного (в плане поступательных движений) и полностью зрелого сперматозоида  с нормальной или близкой к нормальной морфологической структурой. Такой сперматозоид  искусственно вводится непосредственно в цитоплазму ооцита.

Для этого осуществляются следующие манипуляции по этапам:

  • предварительно микроиглой отделяется хвостик от тела отобранного наиболее активного сперматозоида, который, таким образом, обездвиживается; лишение мужской половой клетки ее активности не вредит ей, но необходимо для предотвращения повреждения ооцита движущимся сперматозоидом;
  • последний, но уже без хвостика, путем аспирации втягивается в просвет стеклянной иглы-микропипетки;
  • ооцит фиксируется с помощью микроприсоски с одной стороны в положении «9-и часов»;
  • иглой-микропипеткой со сперматозоидом прокалывается оболочка ооцита с противоположной стороны (в положении «3-х часов) под контролем частичной ее аспирации;
  • сперматозоид из микроиглы аккуратно вводится в цитоплазму яйцеклетки;

После такого оплодотворения ооциты отмываются и помещаются для дальнейшего культивирования (развития) в микрокапли специальной культуры (среды).

Оболочка ооцита очень эластична и самостоятельно быстро закрывается, а такой прокол для клетки малотравматичен и не оказывает влияния на дальнейшее развитие эмбриона. Возможность повреждения яйцеклетки во время манипуляций составляет менее 1%.

Оплодотворение методом ИКСИ осуществляется в случаях:

  1. Когда имеются нарушения количественных и качественных показателей мужских половых клеток, в результате которых они неспособны проникнуть через оболочки яйцеклетки.
  2. Невозможности проникновения даже полноценных сперматозоидов через утолщенную оболочку яйцеклетки, что часто встречается у женщин старших возрастных групп (после 40 лет).
  3. Наличия антиспермальных антител при иммунологическом бесплодии (результаты MAP-теста составляют свыше 50%).
  4. Неудачных попыток оплодотворения в лабораторных условиях в 2-х и более циклах ЭКО при нормальных показателях как женских, так и мужских половых клеток.

Наиболее часто процедура ИКСИ связана с причинами, относящимися к первому пункту, то есть к такой мужской патологии, как:

  • олигозооспермия, выражающаяся в снижении концентрации мужских половых клеток и составляющая меньше 10 миллионов их в 1 мл эякулята; это является фактором, практически исключающим возможность естественного оплодотворения яйцеклетки;
  • астенозооспермия при любых формах олигозооспермии — на фоне концентрации половых клеток в эякуляте, составляющей меньше 20 млн в 1 мл, количество именно активных подвижных сперматозоидов меньше 30%;
  • азооспермия (полное отсутствие сперматозоидов в эякуляте) любой этиологии, но только в тех случаях, когда полноценные клетки можно получить в результате пункции яичек или их придатков.

Процедура ЭКО ИКСИ поэтапно

Метод ИКСИ поэтапно

Методика ИКСИ является частью общей программы экстракорпорального оплодотворения, поэтому начальные ее этапы ничем не отличаются от классической ЭКО. За 1-2 месяца до планируемого периода проведения процедуры семейной паре назначаются необходимые предварительные обследования — общий осмотр, общие и клинические анализы крови и мочи, определение резус-фактора, анализы на наличие инфекций, передающихся половым путем, гормональный статус, ультразвуковое исследование, спермограмму и т. д.

Более подробную информацию о необходимых исследованиях Вы найдете в статье «Анализы при бесплодии».

Кроме того, даются рекомендации женщине и мужчине по образу жизни и способам предохранения во время менструального цикла, в котором предполагается проведение лечения. За 1-1,5 недели до начала менструации, предшествующей началу программы ЭКО методом ИКСИ, женщине проводится повторное эхографическое исследование, позволяющее оценить толщину и состояние слизистой оболочки матки, после чего начинается непосредственно подготовка к ЭКО, представляющая собой этапы по дням.

I этап

При необходимости, но, как правило, в соответствии с одной из разработанных схем, на 21-ый день предшествующего процедуре ИКСИ менструального цикла (при 28-дневном цикле) или на 23-й день (при 30-дневном цикле) назначается прием в течение 1,5 – 2-х недель или дольше одного из агонистов гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРг).

Это необходимо для угнетения самостоятельной активности яичников и повышения эффективности последующей их стимуляции. Возможны и другие схемы, но эта схема («длинная») наиболее часто используемая. О достаточности длительности приема препарата лечащий врач судит по данным мониторингового исследования уровня снижения содержания в крови эстрадиола и проведения УЗИ.

После достижения необходимой степени  угнетения функции яичников дозировка агониста ГнРг снижается в 2 раза и начинается гиперстимуляция их функции в течение 12-14 дней, что дает возможность увеличить в яичниках число фолликулов. В этих целях используются производные гонадотропных гормонов гипофиза («Гонал-Ф», «Менопур» или «Пуригон») в индивидуально подобранных дозах.

От начала их введения ведется отсчет менструального цикла, в середине которого однократно назначается хорионичекий гонадотропин человека («Прегнил»), способствующий дозреванию фолликулов и подготовке их к пункции. Введение же производных гонадотропинов прекращается. Весь процесс лечения также осуществляется под контролем динамики УЗИ и результатов гормональных исследований.

II этап

Целью этого этапа являются:

  • получение яйцеклеток;
  • получение сперматозоидов.

Получение яйцеклеток

Яйцеклетки получают из зрелых фолликулов через 34-36 часов после введения хорионического гонадотропина. Процедура  проводится под общим внутривенным наркозом и эхографическим контролем.

Она заключается в пункции специальной иглой заднего свода влагалища, затем далее — стенки яичника в области фолликула. При затруднении пункции через влагалище, что может быть связано с какими-либо анатомическими особенностями, пункция фолликулов осуществляется лапароскопическим методом.

После пункции фолликула производится аспирация фолликулярной жидкости вместе с ооцитом посредством вакуумного насоса. Длительность всей процедуры составляет от 15 до 40 минут. После забора ооцитов они отмываются в специальной среде и оцениваются специалистом-лаборантом на зрелость и качество.

В этот же день женщине назначаются прогестероновые препараты («Дюфастон», «Утрожестан»), что позволяет поддержать функционирование желтого тела, нормализовать соотношение половых гормонов и подготовить эндометрий к имплантации эмбриона.

После проведения процедуры возможны такие явления, как тошнота, рвота, вздутие живота, понос и т.д. Все они иногда могут быть связаны с приемом гормональных препаратов и развитием различных форм синдрома гиперстимуляции яичников. В то же время, причины вздутия живота после проведения процедуры чаще бывают вызваны нарушением моторики толстого кишечника, развитием пареза кишечника и скоплением газов. Это может происходить вследствие:

  • влияния препаратов для наркоза, особенно, если процедура была длительной;
  • раздражения брюшины во время пункции трансвагинальным методом, а еще чаще — лапароскопическим.

Посленаркозные нарушения кишечной перистальтики, а также связанные с трансвагинальной пункцией сохраняются недолго (не более 1-2 суток), а при лапароскопическом способе пункции они могут длиться до 3-5 дней.

Получение сперматозоидов осуществляется после 5  – 7-дневного полового воздержания в день забора яйцеклеток. Методика их получения может быть разной, в зависимости от имеющейся у мужчины патологии. Это может быть эякулят из презерватива (непосредственно после полового акта), а также полученный в результате мастурбации (обычно), механической вибрации, электростимуляции. При необходимости (обструктивная азооспермия) сперматозоиды могут быть получены с помощью пункции яичка или протока придатка яичка.

Затем сперма разжижается, сперматозоиды отмываются от семенной жидкости и подготавливаются одним из физических методов — фильтрацией, центрифугированием, флотацией или проточной цитометрией. Очень часто удается получить для проведения ИКСИ только единичные подвижные половые клетки, среди которых трудно осуществить надежный отбор. В этом случае применяются другие варианты методики очищения, концентрация спермы, инкубация половых клеток в питательной среде, стимуляция подвижности и т. д.

III этап

Он заключается в искусственном оплодотворении яйцеклетки сперматозоидом методом ИКСИ, описанным  выше поэтапно.

IV этап

Этот период составляет от 2-х до 5-и дней, считая первым днем следующий после оплодотворения. На IV этапе осуществляется инкубация оплодотворенной яйцеклетки с последующим переносом эмбриона в полость матки.

В течение последующих 12-14 недель (до момента формирования плаценты) женщина должна принимать увеличенную вдвое дозировку препаратов прогестерона.

 Прогноз

Метод ИКСИ позволяет обеспечить беременность в среднем в 50%, а нормальное развитие эмбриона — в 90-95%. Хотя он и не увеличивает вероятность наступления самой беременности, но значительно расширяет возможности для определенных семейных пар, поскольку гарантирует оплодотворение яйцеклетки.

ИКСИ не исключает возможности развития врожденной патологии у плода, в связи с отсутствием процесса естественного отбора половой клетки, который действует при естественном оплодотворении.

Однако в последнее время  многими исследователями отвергается предположение о повышенном риске генетических нарушений у плода, связанных с ИКСИ, и высказывается мнение о возможности наследственной передачи заболеваний от родителей. Поэтому до проведения ЭКО этим методом мужчине и женщине все-таки рекомендуется прохождение медико-генетического консультирования.

Оставить комментарий